إنتاج نباتات محورة وراثيا

Slides:



Advertisements
Similar presentations
Genetic Jigsaw Class instructions. Start of lesson Divide the classes into 6 groups: – Origin of replication – Repressor gene – Promoter – Multiple cloning.
Advertisements

PGLO™ Transformation. Central Framework of Molecular Biology DNA RNA ProteinTrait.
Polymerase Chain Reaction - PCR The photocopier of molecular biology.
Lecture 21: Molecular Tools of Genetic Diagnosis Reading Assignment: Chapter 42, pgs ; Harper’s Biochemistry (25 th edition). Objective: To understand.
DNA Sequencing and Gene Analysis
Molecularbiology Green Fluorescent Protein. Alba, the fluorescent bunny.
3 September, 2004 Chapter 20 Methods: Nucleic Acids.
Gene Regulation: What it is, and how to detect it By Jordan, Jennifer, and Brian.
1 Review Describe the process scientists use to copy DNA Use Analogies How is genetic engineering like computer programming 2 Review What is a transgenic.
Genetic Engineering What we can do with genes. Restriction Enzymes: The Video Clip.
Biotechnology Overview
Biotechnology. DNA technology DNA diagnostics DNA therapy.
PGLO™ Transformation and Purification of Green Fluorescent Protein (GFP)
Welcome! to the “Modern Lab” section
Recombinant DNA Technology……….. BTEC3301. DNA Libraries How do you identify the gene of interest and clone only the DNA sequence you are interested? Read.
Bacterial Art and GFP Nick Slawson.
How do you identify and clone a gene of interest? Shotgun approach? Is there a better way?
Recombinant DNA Technology What is it and what is it used for?
Remember the limitations? –You must know the sequence of the primer sites to use PCR –How do you go about sequencing regions of a genome about which you.
NIS - BIOLOGY Lecture 57 – Lecture 58 DNA Technology Ozgur Unal 1.
DNA Technology Chapter 11. Genetic Technology- Terms to Know Genetic engineering- Genetic engineering- Recombinant DNA- DNA made from 2 or more organisms.
Biotechnology l Introduction l Tools l Process l Applications.
FIGURE 7.1. Synthesis of a double-stranded DNA molecule.
How to get the cloned gene? (How to clone or identify the gene?) (1) From academic scientist (2) From company (3) PCR (RT-PCR) (4) From DNA library.
Genetic Engineering 1 Lecture 18 Pages
Recombinant DNA Technology Genetic engineering requires copies of a specific sequence of DNA ( gene) that codes for 1 protein. Example: 1. The jellyfish.
Copyright © Dean Madden, 2013
INTRODUCING…. THE APPLORANGE Finally and orange with an edible peel.
Bioengineering Turning Genes on and off in Bacteria.
Biotech. Cloning a mammal PCR This is the polymerase chain reaction. It is a technique to multiply a sample of DNA many times in a short period of time.
2008 Nobel Prize in Chemistry Green fluorescent protein, GFP Osamu Shimomura Jellyfish/ bioluminescence Purified and characterized GFP (1974) Marty Chalfie.
DNA Technology Part 2.
Question: How do we know where a particular protein
DNA Technology and Genomics
Chapter 20 DNA Technology and Genomics. Biotechnology is the manipulation of organisms or their components to make useful products. Recombinant DNA is.
In the pGLO lab, we will: Use recombinant DNA Genetically engineer E. coli bacteria by inserting a plasmid Plate and grow bacteria Determine if the proteins.
Moving Green Fluorescent Protein
?. gfp-gene as cDNA in a host-DNA-fragment E. coli (new host)  gfp ? ??????? Aequorea victoria (donor) host.
Genetic Transformation of Bacteria and Gene Regulation.
Transport Nucleus Cytoplasm Protein gene DNA mRNA The Cell:
Da-Hyeong Cho Protein Engineering Laboratory Department of Biotechnology and Bioengineering Sungkyunkwan University Site-Directed Mutagenesis.
Site-Directed Mutagenesis
Mosquitoes Bite How to genetically engineer the Anopheles mosquito to be resistant to Plasmodium.
Lecture 3 – Selection of Recombinants & clone analysis The white colonies will all be recombinants, but only one of these many colonies will contain the.
Question: How do we know where a particular protein is located in the cell?
Topic Cloning and analyzing oxalate degrading enzymes to see if they dissolve kidney stones with Dr. VanWert.
Standard 5c. Learning Goals  1. Compare Selective Breeding & Genetic Engineering.  2. Summarize the two main steps in genetic engineering.  3. Explain.
Measurement Methods in Systems Biology
Last Class Isolation of cells Cell Fraction, Centrifuge Chromatography
Midterm Review Feb
Recombinant DNA Technology
DNA Technology Part 2.
PCR Polymerase Chain Reaction
The polymerase chain reaction
Genetic Transformation of Bacteria and Gene Regulation
AP Biology Biotechnology Part 4.
AP Biology Biotechnology Part 4.
Gene Expression 1. Gene expression is the activation of a gene that results in transcription and the production of mRNA. Only a fraction of any cell’s.
PGLO Lab Purpose: To transform E. coli bacteria by adding plasmids that allow the bacteria to glow green under UV light in the presence of arabinose sugar.
Chapter 21 Nucleic Acids and Protein Synthesis
AP Biology Biotechnology Part 4.
Transport Nucleus Cytoplasm Protein gene DNA mRNA The Cell:
Introduction to the pGLO Lab
Genetic Engineering Subtitle.
Transduction of Human Embryonic Stem Cells by Foamy Virus Vectors
Recombinant DNA rDNA.
Copyright © Dean Madden, 2013
Richard A Voit, Moira A McMahon, Sara L Sawyer, Matthew H Porteus 
Biotechnology Mr. Greene Page: 78.
Relationship between Genotype and Phenotype
Presentation transcript:

إنتاج نباتات محورة وراثيا تعنى التعديل الوراثى لإكساب النبات صفة أو أكثر من الصفات التالية: 1- المقاومة للحشرات 2- تحمل مبيدات الأعشاب 3- مقاومة الفيروسات 4- مقاومة التلف المتأخر 5- مقاومة النيماتودا 6- رفع القيمة الغذائية للمنتج الغذائي

Movement protein mediated resistant strategy استخدام الجين المسؤل عن حركة الفيروس C4 ومحاولة اعاقه تعبيره الجينى مع الاستدلال على انتشار الفيروس بالخلية عبر خيوط البلازمودزماتا بدمج جين الحركة C4 و جين اليخضور المضيء green fluorescent protein gene GFP المعزول من قنديل البحرjellyfish Aequorea victoria حيث يعزى أشعاع هذا البروتين وإضاءته الحيوية إلى حامل اللون chromophore الذي يتكون من سلسلة من أحماض امينية لذا يتم استخدامه كدليل كشاف في تحديد موقع التعبير الجينى للفيروس داخل الأنسجة الحية .

4- التقنيات الحديثة المستخدمة 4- التقنيات الحديثة المستخدمة المتعلقة ببروتين الفيروس: الاختبارات المصلية( السيرولوجية) المستخدمة مثل ELISA و , Immunoflorecent assay و, PCR - Immunocapture الهدف : تحديد نوعيه وهوية بروتين الفيروسThe virion” المتعلقة بالحمض النووى للفيروس: ( ا ) الكلونة ( cloning ) الهدف : عزل جين الفيروس المطلوب استحداث المقاومة به فى بلازميد بكتيرى مناسب حتى يمكن التعامل معه 0 ( ب) تفاعل البلمره المتسلسل PCR ( ( polymerase chain reaction الهدف : زيادة تركيز قطع الDNA المستخدمة فى التعديل الوراثى0

آلية هندسة تكوين جين الفيروس الحصول على جزيئات الفيروس بدرجة عالية من النقاوة والتأكد من ذلك برؤية الجزيئات في الميكروسكوب الألكترونى0    إجراء بعض التجارب المصلية( السيرولوجية) للتأكد من السلالة الفيروسية المستخدمة والعائلة ألتقسيميه التابعة لها0 · عزل جينوم الفيروس (الحمض النووي للفيروس ) بالكامل من جزيئات الفيروس المنقاة0

( ج ) تعليم الحمض النووي بالنظائر المشعة والغير مشعة Southern-blot analysis الهدف : التأكد من صحة التتابع النيكليوتيدى المستخدم فى هندسة الجين المطلوب0 ( د ) قراءة التتابع النيكليوتيدى لمعرفة الخريطة الو راثية وعدد الجينات الفعاله بها الهدف : التأكد من بداية ونهاية التعبير الجينى The start codon (ORF) and the stop codon ( ه ) معرفه map restriction خريطة أنزيمات القطع الهدف : للتحكم في هندسة الجينات أثناء التعامل معها وتحويرها وغيرها من الطرق الأخرى المستخدمة .

لماذا الاتجاه الى انتاج نباتات معدلة وراثيا مقاومه للفيروسات؟ لماذا الاتجاه الى انتاج نباتات معدلة وراثيا مقاومه للفيروسات؟ - الفيروسات تصيب جميع العوائل النباتية ( لها مدى عوائلى واسع) على اختلاف انواعها اقتصادية كانت أو غير اقتصادية (مثل الحشائش). - التأثير البالغ على النبات فى احداث انخفاض ملحوظ للمحاصيل الاقتصادية بنسب قد تصل الى 60% - سهولة انتشارها بيئيا يساعدها فى ذلك انتقاله بالاحتكاك الميكانيكى والحشرات و النيماتودا والبذور والأجزاء الخضرية المستخدمة فى التطعيم مثل أشجار الفاكهة. ا لوقاية من الأمراض الفيروسية خير من علاجها حيث لايجدى استخدام المبيدات معها اطلاقا0

Anti- sense replecase mediated resistant strategy

إستراتيجيات انتاج نباتات مقاومة للفيروسات Coat protein mediated resistant strategy استخدام جين الغلاف البروتينى في الحد من أعادة تكوين جزيء الفيروس باستخدام الغلاف البروتينى لسلالة اخرى ضعيفة 0

زيادة تركيز جين الحركة والجين المضيء باستخدام PCR

3- الاستفادة من المعطيات الجزيئية للفيروس استخدام البروتين والحمض النووي لجزيئات الفيروس كأدوات جزيئية molecular tools في التشخيص الدقيق لسلالات الفيروس الواحد . تحديد عدد الجينات الفعالة والتي تتم بقراءة التتابع النيكليوتيدى لجينوم الفيروس الكامل فى محاولة تفهم الاستراتيجية المناسبة التي يستخدمها الفيروس كمسبب مرضى في توظيف وتفعيل هذه الجينات الخاصة به 0 اختيار استراتيجية المقاومة المضادة للفيروس وتطبيقها داخل النبات لتحويره وراثيا0 ا- التعبير الجينى لجينوم الفيروس : 1- تخليق وحدات بروتين تركيبى تدخل فى تكوين جزيء الفيروس0 2- تخليق بروتين غير تركيبى من انزيمات البلمرة وإنزيمات تضاعف الحمض النووى والبروتينات المساعدة فى إتمام الإصابة0

5. عزل الجين الفيروسي المطلوب هندسته وراثيا 5. عزل الجين الفيروسي المطلوب هندسته وراثيا إما بإنزيمات القطع الداخلية أو باستخدام تفاعل البلمرة المتسلسل PCR