ĐỘT BIẾN GEN MÃ HÓA CHUỖI α-GLOBIN HS40 Chuỗi α-globin được mã hóa bởi hai gen α1-globin và α2-globin Gen α2-globin biểu hiện gấp 3 lần gen α1-globin Hầu hết đột biến điểm trong alpha-thalassemia xảy ra trên gen α2-globin Đột biến điểm là nguyên nhân chính gây bệnh HbH

ĐỘT BIẾN GEN GÂY BỆNH HBH --SEA/ααND Đột biến gây bệnh HbH Tên đột biến Kiểu đột biến Đột biến mất đoạn SEA mất 2 gen α Đột biến điểm Hb Constant Spring đột biến kéo dài chuỗi Init CD ATG>A-G đột biến mã mở đầu Đột biến: Init CD ATG>A-G Vị trí đột biến: HBA2: c.2delT

ĐỘT BIẾN MÃ MỞ ĐẦU GEN α2-GLOBIN Đột biến tại mã mở đầu α2-globin làm dịch khung đọc và gây α+-thalassemia A T G T T C C T G … … … … … … … … … ..T A A Met Phe Leu α-globin Trình tự gen α2-globin bình thường A - G T T C C T G … … … A T G … … … ... ……… … … …T A A Met Trình tự gen α2-globin bị đột biến mã mở đầu (ATG  A-G) α-globin biến thể

ĐỘT BIẾN MÃ MỞ ĐẦU GEN α2-GLOBIN Novel mutation of the alpha 2-globin gene initiation codon (ATG-->A-G) in a Vietnamese girl with Hb H disease Waye JS, Eng B, Patterson M, Chui DH, Nisbet-Brown E, Olivieri NF             Phát hiện lần đầu tiên năm 1997 ở bé gái người Việt Nam Năm 2005: Viprakasit phát hiện ở một bé trai bệnh HbH

Xây dựng quy trình xét nghiệm phát hiện đột biến mã mở đầu GIẢI PHÁP ??? Xây dựng quy trình xét nghiệm phát hiện đột biến mã mở đầu

THIẾT KẾ NGHIÊN CỨU Control 1,8 kb IN.VN.WT 794 bp a2-F IN.VN-F IN.VN.mut 1,05 kb IN.VN-R a2-R α2-globin gene Mẫu 1,8 kb 1,05 kb 794 bp H2O - Bình thường X Dương tính dị hợp tử Dương tính đồng hợp tử

KẾT QUẢ THỰC HIỆN 1,8 kb 1,05 kb 794 bp Mẫu 1,8 kb 1,05 kb 794 bp H2O - Bình thường X Dương tính dị hợp tử Dương tính đồng hợp tử NC + H20 M Test c.2delT 1,8 kb 1,05 kb 794 bp Chú thích: M là đường chuẩn; NC là chứng người bình thường; + là mẫu mang đột biến c.2delT; H2O là chứng nước

HƯỚNG DẪN CHỈ ĐỊNH XÉT NGHIỆM Lấy mẫu: 2 ml máu ngoại vi đựng trong ống chống đông EDTA . Chuyển lên phòng xét nghiệm trong vòng 4h kể từ lúc lấy mẫu 2. Chỉ định: “Phát hiện gen bệnh Thalassemia (bằng kỹ thuật PCR-PFLP) (Alpha-Thalassemia, đột biến c.2delT)” Giá tiền: 470.000đ (BHYT thanh toán 100%) Về phần chỉ định xét nghiệm. Cũng tương tự như những xét nghiệm gen di truyền khác. Sử dụng 2 ml máu ngoại vi chống đông EDTA. Bảo quản mẫu ở 4 độ và chuyển lên khoa xn trong vòng 6h. Chúng tôi đã liên hệ với phòng CNTT cập nhật tên xét nghiệm trong Medisoft là “Phát hiện……” Gia của một xét nghiệm là 470.000 được bảo hiểm thanh toán hoàn toàn.

CẬP NHẬT XÉT NGHIỆM THALASSEMIA Phương pháp Alpha - thalassaemia Beta - thalassaemia PCR Đột biến XN hiện làm SEA x CD 41/42 THAI CD 17 FIL CD 95 α4.2 CD 26 α3.7 CD 71/72 HbCS IVSI-5 c.2delT IVSI-1 -28 Strip Assay Phát hiện 21 đột biến α-Thalassemia Phát hiện 22 đột biến β-Thalassemia

Lời cảm ơn! GS. TS. AHLĐ Nguyễn Anh Trí và Lãnh đạo Viện Trung tâm Thalassemia Tập thể Khoa DT-SHPT 3.10.15