Error N.Obeidi

The Kind of Error Random Error Systematic Error

Random Error Random Unpredictable Independent on: Temperature Voltage Equipments ……

Systematic Error Constant Error Proportional Error

Glassware

Glassware Container And Receiver Volumetric Glassware

Container And Receiver Beaker Erlenmeyer Flask Test Tube Reagent Bottle Photometry Cuvettes

Volumetric Glassware Volumetric flask Graduated Measuring Cylinder Pipette

پی پت ها وسایلی هستند برای برداشت و انتقال حجم، معمولا از جنس شیشه بوروسیلیکات، یا بصورت ابزار اتوماتیک یا نیمه اتوماتیک (سمپلر) کیفیت عملکردی پی پت ها و سمپلرها در صورت مهارت استفاده کننده، دو نشانه دارد: صحت، درستی قابلیت تکرارمناسب عملکرد مناسب پیپتها و میکروپیپتها به معنای برداشت صحیح حجم، و توانائی تکرار این عمل میباید مورد بررسی و تایید قرار گیرد.

Various Pipettes

Pipetting technique

روش های بررسی عملکرد پیپت و سمپلر 1- روش توزین با استفاده از ارتباط حجم و وزن به کمک ضریب دانسیته، براساس اندازه گیری وزن آب برداشتی انجام می شود. 2- روش رنگ سنجی رنگ سنجی رقت تهیه شده توسط سمپلر مورد کنترل، با استفاده از موادی که دارای جذب نوری ثابت هستند، اساس این روش ارزیابی است .

1-روش توزین مراحل انجام ارزیابی : 1-روش توزین مراحل انجام ارزیابی : توجه: استفاده از روش توزین در آزمایشگاه های تشخیص پزشکی بعلت عدم دسترسی به ترازوهایی با حساسیت بیش از 1/. میلی گرم برای میکرو پیپتها و سمپلر های کمتر از 1000 میکرولیتر توصیه نمی شود. وسایل مورد نیاز: ترازوی کالیبره، آب مقطر، ظرف توزین (خالی و خشک) و وسیله مورد ارزیابی(پیپت یا سمپلر)

روش انجام ارزیابی: اندازه گیری دمای آب وثبت آن.. اندازه گیری وزن ظرف خالی توزین وثبت آن (w v) انتقال آب به ظرف توزین بااستفاده از سمپلر یا پی پت مورد ارزیابی توزین مجدد ظرف که اکنون حاوی حجم آب منتقل شده است، یا (w f) تکرار مراحل 3و 4 تا ده بار انتخاب ضریب تصحیح براساس دما و فشار (f t) از جدول مربوطه محاسبه تک تک حجم های منتقل شده براساس رابطه زیر : ِDelivered volume = (w f – w v ) * f t

محاسبات: 1-اندازه گیری قابلیت تکرار با تعیین CV درصد از ده حجم منتقل شده پس از اتمام مرحله توزین و استفاده از فرمول Delivered volume ،میانگین و انحراف معیارمحاسبه شده و % CV تعیین میشود. 2-اندازه گیری درصد عدم صحت با استفاده از فرمول Bias Bias% = (Delivered vol.- Nominal vol. ) Χ 100 Nominal vol. حجم اسمی یا Nominal vol . همان حجم ادعائی سمپلر می باشد نتایج برحسب کاربرد با ادعای سازنده مقایسه می شود ، در کارهای روزمره مقادیر بیش از 3% برای عدم دقت و بیش از 5 % برای عدم صحت قابل قبول نمی باشد .

وزن آب در مرحله قبلی- وزن آب در هر مرحله = وزن آب برداشته شده X=X1 + X2 + ……..Xn/n حجم مورد انتظار - میانگین حجم بدست آمده پس از تصحیح Bias = حجم مورد انتظار

No volume 1 4.93 2 9.54 3 14.21 4 19.10 5 24.03 6 28.91 7 33.80 8 38.64 9 43.50 10 48.27

وزن w f – w v حجم Delivered volume 1 0.0188 0.01886 2 3 0.0225 0.02258 4 0.0204 0.02047 5 6 0.0189 0.01896 7 8 0.0186 0.01866 9 0.0196 0.01967 10 ) وزن ظرف توزین= 2گرم w v ( ) در تهران و دمای 25 درجه =1.0034 f t( Delivered volume = (w f – w v ) * f t SD= √(x-x‾)² =0.012 n CV= SD Χ 100=0.012 x100=6.2 % x‾ 0.0195

2- روش رنگ سنجی استفاده از محلول هایی با رقت های مختلف از موادی که مشخصا از قانون بیر پیروی کنند مثل پارانیتروفنل (nm405) ، سولفات آمونیم کبالت (nm 512 )، سولفات مس (nm 650) و رنگ سبز خوراکی (nm 630 (

مراحل انجام ارزیابی به روش رنگ سنجی ارزیابی صحت رقت تهیه شده از رنگ سبزخوراکی در لوله ها ، عینا در بالن ژوژه و توسط پی پت تهیه و جذب نوری بعنوان جذب مورد انتظارقرائت می شود . میانگین بدست آمده ازقرائت رنگ درلوله ها(observed value) با جذب نوری از بالن ژوژه (expected value)مقایسه و براساس فرمول زیرمیزان عدم صحت بیان می شود : Bias%=(observes value-expected value) / expected value *100 Bias%=(0.0195-0.0250)/0.0250 * 100 = 22 % نتیجه برحسب کاربرد با ادعای سازنده مقایسه می شود ، درکارهای روزمره مقادیر بیش از 5% قابل قبول نمی باشد .

جذب نوری دربالن ژوژه(expected val. ) =0 جذب نوری دربالن ژوژه(expected val.) =0.427 میانگین جذب نوری در لوله ها (obs. val.) x‾ =0.481 SD=0.00493 CV% = 1.02 Bias%=(0.481-0.427)/0.427 * 100=3.88 1 0.475 2 0.481 3 0.478 4 0.474 5 0.491 6 0.482 7 0.479 8 0.485 9 0.483 10

Required Tolerance for Volumetric Glassware Capacity, mL Pipetts Class A or Equiv.TD Graduated Cylinder TD Volumetric Flasks (Class A) TC 1 ± 0.006 ± 0.1 ± 0.01 10 0.02 0.1 25 0.03 0.3 100 0.08 0.6 200 0.10 1.4

Cleaning Of Glassware Rinse with tap water Soak in water with small amount of detergent for at least 1 hour Use a cleaning brush Rinse with deionized water 3-5 times Dry in a hot oven ( <100 C) or RT Check glassware for cleanliness randomly

Plastic ware/Types Polyethylene , Polypropylene Polyolefin Polycarbonate Teflon

Advantages/Disadvantages Unbreakable Not release ions Bind various solutes Polyethylene permeable to water Binding to dyes, iodine ,picric acid

Cleaning Of Plastic ware Like glassware Some of them are not autoclavable