Received for publication, April 24, 2003 Published, JBC Papers in Press, April 28, 2003, DOI /jbc.M Tommi J. Ahonen ‡ §¶, Jianwu Xie ‡ ¶, Matthew J. LeBaron ‡, Jianqiong Zhu ‡, Martti Nurmi, Kalle Alanen**, Hallgeir Rui ‡, and Marja T. Nevalainen ‡ ‡‡ Inhibition of Transcription Factor Stat5 Induces Cell DeathofHuman Prostate Cancer Cells* 班級 : 生科四甲 學生 : 梁育銘

男性泌尿生殖系統構造圖

症狀 症狀 早期的攝護腺癌是沒有症狀的。當攝護腺 癌侵犯到尿道時, 病患會 有頻尿、夜尿、尿 急、尿流細小、尿道疼痛和血尿等症狀, 和 良性 攝護腺肥大的症狀類似。當攝護腺癌 轉移到骨骼, 如腰椎骨時, 就 會造成腰背疼 痛以神經痛的症狀。 早期的攝護腺癌是沒有症狀的。當攝護腺 癌侵犯到尿道時, 病患會 有頻尿、夜尿、尿 急、尿流細小、尿道疼痛和血尿等症狀, 和 良性 攝護腺肥大的症狀類似。當攝護腺癌 轉移到骨骼, 如腰椎骨時, 就 會造成腰背疼 痛以神經痛的症狀。

Introduction攝護腺癌常見於 50 歲以上的男性。在美國僅次於肺癌 及大腸 癌，是男性常見的癌病，美國 的罹患率是每十萬 人口有七千人（或 者說每六個美國男性就有一人， 在一 生當中會罹患此病），以 1995 年為例， 在 所有該年新檢測出的癌症之中，攝 護腺癌就佔了 36% 。每年有 240,000 個新的病例被檢出，並造 成超過四萬人的死亡。 50 歲以上的男性。在美國僅次於肺癌 及大腸 癌，是男性常見的癌病，美國 的罹患率是每十萬 人口有七千人（或 者說每六個美國男性就有一人， 在一 生當中會罹患此病），以 1995 年為例， 在 所有該年新檢測出的癌症之中，攝 護腺癌就佔了 36% 。每年有 240,000 個新的病例被檢出，並造 成超過四萬人的死亡。

Abstract 從 40 個病患身上所取得的攝護腺腫 瘤組織切片, 在其樣本中我們發現 大約 26 個人 (65%), 它的 Stat5 有異 常活化的現象, 因此作者大膽假設 異常活化的 Stat5 和攝護腺腫瘤有 一定的關係, 所以它提出阻斷 Stat5 的功能可能是一種治療攝護腺腫瘤 的一個新方法 。 從 40 個病患身上所取得的攝護腺腫 瘤組織切片, 在其樣本中我們發現 大約 26 個人 (65%), 它的 Stat5 有異 常活化的現象, 因此作者大膽假設 異常活化的 Stat5 和攝護腺腫瘤有 一定的關係, 所以它提出阻斷 Stat5 的功能可能是一種治療攝護腺腫瘤 的一個新方法 。

STATs 蛋白質簡介 : STATs 蛋白質的發現, 最早是由於 干擾素的研究, 由於 INF 刺激細胞後, 會產生一群特定基因的表現, 而發 現這些基因的表現, 是需要 STATs 蛋白質的參與作用,STATs 蛋白質它擁有兩種生物功能 : 1. 將訊息由細胞表面傳到細胞核內 2. STATs 蛋白質也參與其基因表現調控

STATs Family: STATs Family 的成員有七個 : 包括 STAT1. STAT2….. 到 STAT6, 除了 STAT2.STAT6 較大, 大約是 850 個 amino acids, 其它大 約是 個 amino acids, 然後 STAT5 它有兩個同 源性的基因產物分別是 STAT5a- 94-kDa (Tyr-694) STAT5b- 92-kDa (Tyr-699) JAK2

STAT3 Signaling Pathway

名詞介紹 Ad- adenovirus 為一個 DNA 腫瘤病毒, 可做為真核細胞基因表現之研究 DNStat5- dominant-negative Stat5 顯性 - 抑制型的 Stat5, 為 Stat5 的一個 mutant, 喪失其活化功能 AdDNStat5-Adenoviral gene delivery of a dominant-negative Stat5 STAT-Signal transducer and activator of transcription

Materials 1.CWR22Rv 2.LNCap 3.Pc-3 cells 從 40 個病人身上所取得的攝護腺腫瘤組識切片

Anti-phospho-TyrStat5Anti-pan-Stat5 Human prostate cancer cells

Normal human prostate epithelium Anti-phospho-TyrStat5

A dose-dependent effect on cell viability of adenoviral gene delivery of a dominant-negative Stat5 mutant (AdDNStat5)

Morphology of cell death induced by AdDNStat5 in CWR22Rv and LnCap cells ( 72h, 8 m.o.i) ( 96h, 32 m.o.i)

Dose-dependent expression of WTStat5 or DNStat5 in CWR22Rv and LnCap cells

DNA fragmentation analyzed by nucleosomal ELISA after exposure to AdDNStat5, AdWTStat5,AdlacZ, AdCtrl, or mock infection in CWR22Rv and LNCap ( 48h, 8 m.o.i) ( 72h, 32m.o.i)

用 Flow Cytometry 測量細胞 DNA 含量和細胞 的大小, 來檢測凋亡細胞

DNStat5-induced cell apoptosis involved caspase-3 activation ( 36h, 8 m.o.i) ( 48h, 32 m.o.i)

DNStat5- induced caspase-3 activation is associated with activation of caspase-9.

結論 用原位偵測法去測定磷酸化和細胞核的 Stat5, 在大部份我 們檢測的攝護腺腫瘤細胞發現它的 Stat5 是活化的, 所以我 們提出如果抑制 Stat5 的活化可以是一種新的基因療法, 它 可以廣泛應用在治療攝護腺腫瘤細胞上, 我們觀察到 CWR22Rv 和 LNCap 這 兩個腫瘤細胞中, 阻斷 Stat5 的活化可以引發一連串的反應, 如 caspase-3caspase-9 和的活化最後誘導整過攝護腺腫瘤細胞 apoptosis, 來達到 治療腫瘤的效果.