微生物实验 合肥工业大学生物与食品工程学院

微生物学实验室规则 一、进实验室前必须身穿实验用白大褂，不得穿短裤、 拖鞋，女生上课必须将长发扎起。非必要物品禁止 带人室内。 二、按规定座次入座，按规定镜号取用显微镜。 三、室内保持安静，不许高声说话、谈笑，避免不必 要的走动。严禁随地吐痰，严禁在室内吸烟。 四、实验课前必须充分预习实验内容。实验过程中， 要及时记录实验现象与结果。 五、用完显微镜后应仔细检查，保持镜身洁净、干燥， 使用油镜头后务必将油拭净。

微生物学实验室规则 六、实验中需要培养的材料应写好标签，注明组别、 姓名、实验日期等，并放到指定地点进行培养。 七、从培养箱或冰箱中取放物品时应随手关门。 八、对试剂等耗材要力求节约，用毕后仍放回原处。 损坏玻璃器皿要赔偿。 九、实验结束，要及时整理擦净台面。值日生要扫 净地面，关好水、电、门、窗后再离开实验室。

目 录 实验一 普通光学显微镜的使用 实验二 细菌形态和结构观察（Ⅰ） 实验三 细菌形态和结构观察（Ⅱ） 实验四 放线菌形态结构观察 实验五 酵母菌形态结构观察及测微技术 实验六 霉菌形态结构观察 实验七 培养基的制备和常用器皿的准备 实验八 土壤中细菌、放线菌、酵母菌及霉菌的分离与纯化 实验九 环境因素对微生物生长的影响 实验十 细菌生化实验 实验十一 微生物生长测定 实验十二 牛乳中细菌的检查 （验证）（验证）（验证）（验证）（验证）（验证）（验证）（综合）（验证）（验证）（验证）（综合）

实 验 一 普通光学显微镜的使用

一、实验目的 1 、了解普通光学显微镜的构造、各部分的功能及使 用方法。 2 、掌握普通光学显微镜，重点是油镜的正确使用方 法。

二、实验原理 机械 装置 光学 装置 聚光器 聚光器透镜虹彩光圈升降螺旋 物镜上数字意义： 160 ：镜筒长度 40 ：物镜放大倍数 0.65 ：数值孔径 0.17 ：要求盖玻片的厚度 显微镜的放大倍数：物镜放大倍数 × 目镜放大倍数

显微镜的分辨率 分辨率＝ λ/2NA ＝ λ/2 n·sinθ n ：介质折射率 θ ：光线镜口角的半数 图 物镜的镜口角 1 －物镜 2 －镜口角 3 －标本面 提高分辨率 增加视野的照明度

三、实验材料 1 、菌种：自制涂片。 2 、溶液或试剂：香柏油、洗液（ 30 ％乙醇＋ 70 ％乙醚 ）。 3 、仪器或其他用具：普通光学显微镜、擦镜纸等。

四、实验步骤 1 、观察前的准备： 2 、显微观察： 3 、显微镜用后处理。  显微镜的放置  显微镜的调节 光源调节 光源调节 瞳距调节 瞳距调节 观察顺序：低倍镜 → 高倍镜 → 油镜 下降载物台 → 放置染色标本并置于物镜正下方 → 下降 10 倍物镜 → 粗调升起镜筒 → 使用推进器找到 目标 → 认真观察 →40 倍物镜转入光路 → 利用微调 调节 → 观察 → 物镜转出光路 → 滴加镜油 → 油镜转 入光路 → 利用微调调节 → 观察 上升镜筒，取下载玻片 → 擦洗油镜（三遍：擦镜 纸 → 蘸有洗液的擦镜纸 → 擦镜纸）各部分还原 （物镜呈 “ 八 ” 字形放置）

五、注意事项 1 、取放显微镜一手拖底座，一手握镜臂。 2 、观察时双眼睁开。 3 、观察顺序：低倍镜 → 高倍镜 → 油镜

六、实验报告 1 、分别绘出你在低倍镜、高倍镜和油镜下观察到的 枯草芽孢杆菌简单染色后的形态，同时注明物镜放 大倍数和总放大率。 2 、影响显微镜分辨率的因素有哪些？