关于淀粉体形态和发育的研究 报告人:王曼曼 导 师:王忠教授
研究现状 研究内容 实验材料与方法 初步实验结果 下一步工作计划 选题依据
1 选题依据 淀粉是细胞中碳水化合物最普遍的贮藏形式,它为人类提 供 70% ~ 80% 的热量,在人类生活中起着举足轻重的作用。 随着社会发展和人民生活水平的提高,以淀粉为原料的各种 精制食品、方便食品、保健食品及营养食品迅速增加,淀粉 应用范围也不断扩大 ; 同时,人们对淀粉及其制品的品质也提 出了更高的要求。
在这种需求下,淀粉品质及其形成 机理成为近期研究工作的热点。而淀粉 又以颗粒的形式 存在于植物的淀粉体中, 淀粉体的形态和发育影响着淀粉的品质。 因此,对淀粉体的结构、分布和发育等 方面的研究具有重要的意义.
本试验采用树脂切片法,采用光镜和电镜观察淀粉粒 的形态和结构,从而为探索淀粉类植物淀粉粒分化和发育 的内在机制, 以及提高其产量和品质等方面提供理论依 据。 水稻、小麦等淀粉含量较高的农作物淀粉体的形态、 大小 、排列等特性对其品质及产量影响方面的研究已有大 量报道,并明确胚乳细胞的增殖、发育和淀粉等营养物质 的充实状况决定了子粒的质量与品质 。而对红薯、马铃薯、 莲藕、山药、板栗等淀粉类植物淀粉体的形态、结构以及 发育的内在机制研究的还不多。
2 研究现状 禾谷类作物开花后几天,正在发育的胚乳开始积累淀粉。 胚乳细胞壁开始形成的 24h 内,在胚乳细胞中就能观察到淀 粉的存在。在胚乳生长过程中,淀粉粒持续不断地分化发育。 水稻和小麦的胚乳体 积占颖果的 90% 左右,胚 乳淀粉的生物合成与籽粒 产量和品质的形成有直接 的关系。
水稻胚乳细胞淀粉体的发育 淀粉在胚乳细胞内的出现约在受精后的 4 ~ 5 天。一般 籽粒中央的胚乳细胞内首先形成淀粉粒,到了 15 天淀粉粒的 直径已可达 30 ~ 40 微米。位于籽粒边缘的胚乳细胞内的淀 粉粒则较小,直径一般只有 10 ~ 20 微米。 水稻胚乳细胞内的淀粉粒都以复粒形式积累。每一复粒 中有许多近似多角形的淀粉粒小粒紧密地堆积在一起。整个 复粒淀粉粒由一层膜包裹着,呈椭圆形。在乳熟期复粒淀粉 粒都散布在胚乳细胞内,但当籽粒进入蜡熟期时,由于胚乳 细胞开始失水,复粒淀粉快速膨大和蛋白质的积累,淀粉粒 都被粘挤在一起。
到完熟期时,整个胚乳细胞都充满复粒淀粉粒和 蛋白质小粒,形成一个相当坚实的结构。在复粒淀粉之 间的蛋白质颗粒,大多呈圆球形,直径在 1 ~ 4 微米。 每一颗粒都似乎有一层膜包围着。 成熟水稻胚乳细胞中充满了淀粉粒。由于在积累过 程中相互在三维空间上的挤压,每个淀粉粒皆呈多边形 球体。
不同作物胚乳细胞中淀粉粒形态的比较 在多种作物上已考察了淀粉粒的形态和体积分 布。玉米和水稻的淀粉粒形态单一,其体积范围分 别为 10 ~ 50μm 和 1 ~ 10μm 。相反,小麦、大麦和 黑麦的淀粉粒则有 2 种形态类型,即 “A” 型淀粉粒直 径 20 ~ 45μm ,扁豆状; “B” 型淀粉粒直径小于 10μm ,球形。
3 研究内容 不同植物淀粉粒的形态 水稻胚乳淀粉体分化和发育的过程 水稻不同部位淀粉体的形态 淀粉体和淀粉粒的功能
植物淀粉粒的不同形态 不同植物淀粉粒的形态、大小差异很大 ,淀粉 粒的形状有圆球形、卵圆形、长圆形或多角形等, 脐点的形状有颗粒状、裂隙状、分叉状、星状等, 有的在中心,有的偏于一端。淀粉还有单粒、复粒、 半复粒之分。 本实验将借助光镜和电镜系统, 观察不同淀粉类 植物淀粉粒的形态结构。
水稻胚乳淀粉体分化和发育的过程 前人对水稻胚乳细胞的发育和结构特点已有大 量的研究,但对于胚乳淀粉合成的机制还没有完 全弄清楚,对于淀粉体在充实过程中分化和发育 的研究也仅停留在表面。 本实验在借鉴他人工作 的基础上继续深入,探明水稻胚乳细胞淀粉体在 各个发育时期的超微结构,弄清其淀粉体及淀粉 粒的分化和发育过程。
植物的谷粒 板栗、菱角 马铃薯、芋头 水稻、小麦、玉米 红 薯 荸 荠 莲藕、山药 扬州 大学 农学 院大 田中 种植 市场上购买市场上购买 4 实验材料与方法 实验材料实验材料 植物的果实 块 茎 根状茎 块 根 球 茎
I-IK 染色 扫描电镜 (SEM) 观察样品 光镜和透射电镜 (TEM) 观察样品
I-IK 染色法初步观察淀粉粒的形态 取植物组织材料一小块,用刀片刮取少许液汁, 放于载玻片水滴中,滴 I-IK 溶液 一滴,盖片观察 其淀粉粒形态。 I-IK 可以将淀粉粒染成蓝黑色,初步观察不同植物 淀粉粒的形态.
扫描电镜 (SEM) 观察 取根茎叶自然断裂 取 样 戊二醛固定 PBS 清洗( 3 次) 乙醇、丙酮体系脱水 中间液置换 零界点干燥粘 样真空喷金扫描观察
光镜和透射电镜 (TEM) 观察 取样前固定 后固定脱水 置换包埋 半薄切片 TBO 染色 光镜观察 超薄切片双重染色电镜观察
水稻胚乳中的淀粉是复粒淀粉,即一个淀粉体里含 有多个淀粉粒,这是因为淀粉体中的淀粉粒是相互独立 存在的,互不连接地膨大的结果。 在胚乳细胞尚未被淀粉体充满时,淀粉体成椭圆形, 其中淀粉粒少棱角,当胚乳细胞被淀粉体充满时,淀粉 体和其中的淀粉粒因相互挤压,均成为多角形。 花后16天水稻颖果 I-IK 染色 5 初步实验结果
小麦颖果淀粉是单 粒淀粉,即一个淀粉体 内仅含有一个淀粉粒, 多数呈鹅卵石形,淀粉 体有大小两种形态 : 大 的直径为 10 ~ 30um , 在早期形成,小的直径 为 5 ~ 8um ,在中后期 出现,通常认为小淀粉 体是由大淀粉体分裂而 来的。
玉米胚乳淀粉粒 多为圆形或多角形的 单粒,淀粉粒直径为 5 ~ 26um 。在胚乳细 胞尚未被淀粉体充满 时,淀粉体成圆形, 当胚乳细胞被淀粉体 充满时,淀粉体和其 中的淀粉粒因相互挤 压,均成为多角形等 不规则形。
板栗可以观察到较多的淀粉粒,淀粉粒呈椭圆形或柱 形,淀粉粒形态饱满,淀粉粒之间具有一定的间隙。
红薯淀粉粒 多数为光滑的圆 球形的单粒,是 粒心为不规则放 射状具偏心轮纹 的单粒(为主) 还有少量的由 2 - 3 个单粒构成 的复粒。
马铃薯淀粉粒多为椭圆形的单粒淀粉,且脐点多为偏 心型,少有复粒淀粉,偶见半复粒淀粉。
莲藕淀粉颗粒透 明,典型藕淀粉颗粒 的自然形态为长 10 ~ 50um ,宽 4 ~ 15um 的长粒形,表面有轮 纹,一端有脐点或偏 光十字 ( 偏振光下 ) 。 未成熟的藕淀粉颗粒 为直径约 6um 大小的 球形或不规则粒形。
山药淀粉粒单 粒扁卵形、类圆形、 三角状、卵形或矩 圆形,直径 8 ~ 35μ m,脐点点状、人 字状、十字状或短 缝状,可见层纹; 复粒稀少,由 2 ~ 3 分粒组成。
6 下一步工作计划 ( 1 )对其它的淀粉类植物 I-IK 染色,扫描电镜观察,初步 观察淀粉粒的形态结构和分布。 ( 2 )继续对包埋好的材料进行半薄切片,选取好的切片, 显微镜观察并拍照,进一步观察不同植物淀粉粒的形态 和内部结构。 ( 3 )在光镜观察确定需要作超微结构部位的基础上, 进一 步作超薄切片, 用透射电镜观察淀粉粒的超微结构,从而 观察淀粉体和淀粉粒的分化和发育过程。
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