1. 第八章 对氨基苯甲酸酯和酰苯胺 类局麻药物的分析 Analytical of Aromatic amines

2. 第一节 对氨基苯甲酸酯类和酰苯胺类药 物的结构与性质

3. 苯佐卡因 盐酸普鲁卡因胺 盐酸普鲁卡因 盐酸丁卡因 一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构与典型药物

4. 酰胺类： 盐酸利多卡因 二、酰苯胺类药物的基本结构与典型药物

5. 醋氨苯砜 盐酸布比卡因 二、酰苯胺类药物的基本结构与典型药物

6. 三、主要理化性质 1. 芳伯氨基特性 : 显重氮化 - 偶合反应 ; 与芳醛缩合成 Schiff 碱的反应；易氧化变色 。 ( 盐酸丁卡因，无 ) 2. 水解性：因分子结构中有酯键。 3. 弱碱性：能与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应；在非水溶剂 中能滴定。 4. 溶解性：游离碱难溶于水，可溶于有机溶剂；盐酸盐易溶 于水和乙醇，难溶于有机溶剂。

7. 5. 与重金属离子（铜离子或钴离子）发生沉淀反应： 生成有色的配位化合物沉淀 6. 吸收光谱特性：苯环及相应的取代基与脂烃胺侧 链，具紫外与红外光谱行为 三、主要理化性质

8. 第二节 鉴别试验

9. 一、重氮化 - 偶合反应 芳伯氨基或潜在的芳伯氨基 生成重氮盐可与碱性 β- 萘酚偶合生成有 色的偶氮染料。  盐酸丁卡因无此反应，可鉴别

10. 苯佐卡因、盐酸普鲁卡因

11. 苯佐卡因 鉴别试验

12. 芳仲胺基：可以发生亚硝酸钠反应 乳白色

13. 二、与重金属离子反应 1. 与铜及钴离子反应 芳酰胺  盐酸利多卡因在碳酸钠试液中，与硫酸铜反应生成 蓝紫色 配位化合物，转溶于氯仿中呈黄色。  与盐酸普鲁卡因、盐酸丁卡因和苯佐卡因相区别

14.  盐酸利多卡因在酸性溶液中与氯化钴试液作用， 生成亮绿色钴盐沉淀。

15. 2. 与汞离子反应  盐酸利多卡因的水溶液加硝酸酸化后，加硝酸 汞试液煮沸，显黄色。  对氨基苯甲酸酯类药物显红色或橙黄色  用于区别

16. 3. 羟肟酸铁盐反应 基于普鲁卡因胺分子中的 芳酰胺结构。

17. 三、水解产物反应 1. 盐酸普鲁卡因的鉴别方法 鉴别试验

18. 2. 苯佐卡因的鉴别方法 取本品约 0.1g ，加氢氧化钠试液 5ml ，煮沸， 即有乙醇生成，加碘试液，加热，生成黄色沉淀， 并发生碘仿的臭气。 鉴别试验

19. 四、 制备衍生物测熔点 1. 三硝基苯酚衍生物的制备： 利多卡因和布比卡因

20. 2. 硫氰酸盐衍生物的制备 盐酸丁卡因

21. 五、吸收光谱特征 （一） UV 盐酸布比卡因在 0.01mol/L HCl% 中 0.40mg/ml λ max =263nm 、 λ max =271nm ； A 263 =0.53- 0.58 A 271 =0.43-0.48 ( 二 )IR

22. 第三节 特殊杂质与检查

23.  来源：水解反应（制备时）  可进一步脱羧为苯胺，又可被氧化为有色物，使注射液 变黄、疗效下降、毒性增加。  限度： 0.5% （原料药） 1.2% （注射液）  检查方法： HPLC 一、盐酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸的检查

24. 二、盐酸氯普鲁卡因注射液中有关物质和光解产物的检查 注射液在一定灭菌温度、时间和溶液 pH 下，发生水解反应，生成 4- 氨基 -2- 氯苯甲 酸降解产物。 采用液质联用技术进行检查

25. 三、盐酸利多卡因注射液中 2,6- 二甲基苯胺及其他杂质的 检查  生产和贮藏过程水解产生 2,6- 二 甲基苯胺  检查方法： HPLC

26. 四、盐酸罗哌卡因的光学纯度检查  盐酸罗哌卡因分子有一个手性碳原子，二个对映 体， R- 罗哌卡因心脏毒性较大，临床上应用 S- 罗 哌卡因对映体。  采用毛细管电泳法进行对映体纯度检查

27.  电泳条件与系统适用性试验  石英毛细管柱  温度 30 ℃  电压 500V/s 速度施加，最后稳定 375V/cm  电流 40 ~ 45µA  波长 206nm  信噪比 ≥ 10  R 与 S 迁移时间分别为 0.96 和 1.0  R≥3.7 四、盐酸罗哌卡因的光学纯度检查

28. 第四节 含量测定 容量分析方法 色谱法 分光光度法 亚硝酸钠滴定法 非水溶液滴定法 spectrometry sodium nitrite method volumetric analysis chrometography

29. 一、亚硝酸钠滴定法 1. 原理：芳伯氨基或水解后具有芳伯氨基 在酸性液中与亚硝酸钠定量反应，生成重氮盐， 永停滴定 法指示反应终点。

30. 1 ）加入适量溴化钾加速反应 重氮化反应的历程为： 2. 测定条件 亚硝酸钠滴定法 NaNO 2 +HClHNO 2 +NaCl HNO 2 +HClNOCl+H 2 O Ar-NH 2 NO + Cl - 慢 Ar-NH-NO 快 Ar-N=N-OH 快 Ar-N 2 + Cl -

31.  第一步反应快慢与 芳伯氨基游离程度 直接相关  若芳伯氨基的碱性较弱（在苯胺芳环上，尤其在 对位，有磺酸基、硝基、羧基和卤素等），则在 一定强度酸性溶液中成盐的比例较小，即游离芳 伯氨基较多，重氮化反应速度就快。  芳伯氨基碱性较强（在苯胺芳环对位上有烷氧基、 羟基、甲基等），则在一定酸性液中成盐比例较 大，游离芳伯氨基较少，则重氮化反应速度就慢。 亚硝酸钠滴定法

32.  在测定具有能增强芳伯氨基游离的取代基的药物， 于供试液中需加入适量的 溴化钾 （ 2g) 使加速重氮 化反应。 由于（ 1 ）式的平衡常数比（ 2 ）式的约大 300 倍，即 生成 NOBr 量大很多，也就是在供试液中 NO + 的浓 度大很多，所以能加速重氮化反应的进行。 亚硝酸钠滴定法 HNO 2 +HBrNOBr+H 2 O （1）（1） HNO 2 +HClNOCl+H 2 O （2）（2）

33. 2 ）加过量盐酸加速反应 酸酸的种类：胺类的盐酸盐较其硫酸盐溶解度大，反应 速度快，所以多采用盐酸。 酸酸量：实际芳胺类药物与酸的 mol 比为 1 ： 2.5~6 。 加过量的盐酸可加快重氮化反应的速度，使重氮盐在 酸性溶液中稳定，并防止生成偶氮氨基化合物。 亚硝酸钠滴定法

34. 3 ）滴定温度  温度高，反应速度快  温度高时，可使亚硝酸逸失，并可使重氮盐分解  在室温 10-30 ℃时滴定 4 ）滴定速度 先将滴定管尖端插入液面下约 2/3 处，较快放出滴定液， 而在滴定管尖提出液面后，滴定宜慢，尤其在近终点时。 亚硝酸钠滴定法

35. 3. 指示终点的方法 （ 1 ）永停滴定法 ChP 亚硝酸钠滴定法 电极反应： 阴极： HNO 2 ＋ H ＋ ＋ e →NO ＋ H 2 O 阳极： NO ＋ H 2 O→HNO 2 ＋ H ＋ ＋ e 缺点：电极易钝化 HNO 3 +FeCl 3 试液或铬酸 液 温热活化 5 ～ 10min

36. （ 2 ）外指示剂法  试剂：碘化钾 - 淀粉糊剂或试纸  原理：稍过量的亚硝酸钠在酸性液中氧化碘化钾, 析出的碘遇淀粉即显蓝色。  适用范围：多种药物及制剂的亚硝酸钠滴定法。  使用方法 亚硝酸钠滴定法

37.  外指示剂法缺点 a. 滴定溶液的酸性强，未达终点时，碘化钾在酸性液中遇光 被空气缓缓氧化，也能游离出碘，与淀粉显蓝色而混淆终 点。 b. 亚硝酸钠液（ 0.1mol/L) 在过量 1~2 滴时，方可灵敏的指 示终点。 c. 多次外试也可损失供试品而增加滴定误差。 亚硝酸钠滴定法

38. （ 3 ）内指示剂法 如 0.1% 橙黄Ⅳ -0.15% 亚甲蓝混合指示剂，此法较 简便，但重氮盐有色时，特别是颜色较深者，则较 难观察终点的变化。 亚硝酸钠滴定法

39. 二、非水溶液滴定法 1. 原理  利用叔胺结构的弱碱性  溶剂：冰醋酸和醋酐溶液  滴定液：高氯酸滴定液  指示剂：结晶紫（显蓝绿色为终点）  加醋酸汞：消除生成的氯化氢干扰

40. 2. 讨论  滴定盐酸丁卡因时，加入适量醋酐的目的： 因盐酸丁卡因在冰醋酸中显较弱的碱性 ，加入的醋酐解离 生成的醋酐合乙酰阳离子比醋酸合质子的酸性还强，有利 于丁卡因碱性的增强，使滴定突跃敏锐。

41.  加入醋酸汞溶液的目的： 由于药物均为盐酸盐，用高氯酸滴定时有强酸 HX 生成， 则反应不能进行到底，并影响滴定终点，加入醋酸汞溶液 使生成醋酸和氯化汞，以除去 HX 的干扰。 B · H + X - +HClO 4 → B · H + ClO 4 - +HX B · H + X - +Hg(Ac) 2 → B · H + Ac - +HgCl 2 B · H + Ac - +HClO 4 → B · H + ClO 4 - +HAc

42.  注射用盐酸丁卡因的含量  于 310nm 波长处测吸收度  采用对照品比较法 三、紫外分光光度法

43. 盐酸利多卡因注射液 色谱条件及系统适用性试验： 色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶 流动相为磷酸盐缓冲液－乙腈 (50:50); 检测波长： 254nm. 理论板数按利多卡因峰计算不低于 2000 四、 HPLC 法

44. 练习与思考 [A 型题 ] 1 ．盐酸普鲁卡因中检查的特殊杂质是 A. 水杨醛 B. 间氨基酚 C. 水杨酸 D. 对氨基苯甲酸 E. 氨基酚 2 ．对乙酰氨基酚中检查的特殊杂质是 A. 水杨醛 B. 间氨基酚 C. 对氨基酚 D. 苯甲酸 E. 苯酚 3 ．肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素中检查的特殊杂质是 A. 水杨醛 B. 间氨基酚 C. 对氨基酚 D. 酮体 E. 苯甲酸

45. [B 型题 ] A. 硫酸铜反应 B. 氧化反应 C. 还原反应 D. 水解后重氮化 - 偶合反应 E. 重氮化 - 偶合反应 1. 盐酸利多卡因 2. 肾上腺素 3. 盐酸普鲁卡因 4 ．对乙酰氨基酚 A B E D

46. A. 溴量法 B. 紫外分光光度法 C. 亚硝酸钠滴定法 D. RP-HPLC 法 E. 非水滴定法 5. 盐酸去氧肾上腺素 6. 肾上腺素注射液 7. 盐酸普鲁卡因 8 ．对乙酰氨基酚 A D C B

47. [X 型题 ] 1. 直接能与 FeCl 3 产生颜色反应的药物有 A. 盐酸普鲁卡因 B. 盐酸去氧肾上腺素 C. 对乙酰氨基酚 D. 盐酸利多卡因 E. 盐酸丁卡因 2. 直接和水解后能发生重氮化 - 偶合反应的药物有 A. 盐酸丁卡因 B. 盐酸普鲁卡因 C. 对乙酰氨基酚 D. 对氨基酚 E. 盐酸肾上腺素