1. 120507 Total Iron Binding Capacity (TIBC)
Clinical Chemistry

2. Introduction Iron Total iron in body : 4-5 g
Distribution of iron in body
Active form (70-75%) : Hemoglobin, Myoglobin, Transferrin
Storage form (25-30%) : Ferritin, Hemosiderin

3. Introduction Pathway of iron
Figure 1Main pathways of iron metabolism in mammals.
Ferrireductase
Divalent metal transporter (DMT1)
Haem protein carrier 1 (HPC1)
Haem oxygenase
Haem exporter
Ferroportin (Ireg-1)
Hephaestin/caeruloplasmin
Transferrin receptor-1 (TfR1)
Diferric transferring–TfR1 complex
Natural resistance macrophage protein (Nramp-1)
Mitoferrin
Mitochondrial haem exporter (Abcb6)
Others : bacteria, lactoferrin, haemoglobin–haptoglobin, haem–haemopexin, etc.
Caeruloplasmin
Transferrin receptor-2 (TfR2)
Disorders of iron metabolism. Part 1: molecular basis of iron homoeostasis. Manuel M. et. al., J. Clin. Pathol. 2011;64:

4. Introduction Total iron binding capacity (TIBC)
The total amount of transferrin in serum
TIBC = UIBC + serum Fe
Unsaturated iron binding capacity (UIBC)

5. Clinical significance
Reference value
Male : ug/dl
Female : 250 – 450 ug/dl
Pathological conditions

6. Principle Iron (Fe3+) saturation Iron (Fe3+) extrication
FeCl3 solution in serum
TIBC saturated by Fe3+
Excess Fe3+ + MgCO3 → precipitation
Iron (Fe3+) extrication
Acetic acid

7. Principle Iron (Fe3+) reduction Formation of chelate complex
Ascorbic acid
Fe3+ + e- → Fe2+
Formation of chelate complex
2-(5-Nitro-2-pyridylazo)-5-(N-propyl-N-sulfopropylamino)-phenol
Formation of brown chelate complex

8. Method 시험관 Test serum 0.2 ml 철용액 0.4 ml 혼합 흡착제 한 스푼 (대략 50 mg)
잘 혼합하고 실온에 5 min 이상 방치 후 3000 RPM 10 min 원심분리
상층액을 0.1 ml 취하여 TIBC의 검체로 아래 방법과 동일하게 실행함
serum
standard
Blank
시료(ml)
serum 0.1
표준액 0.1
증류수 0.1
사용완충액(ml)
2.0
잘 혼합하여 37 ℃에서 5 min 가온
정색시액(ml)
0.5
잘 혼합하여 37 ℃에서 5 min 간 가온 한 후, 실온에 5 min 이상 방치하여
2 hrs 이내에 blank를 대조로 590nm에서 흡광도 측정

9. Absorbance of standard
Method
Calculation
TIBC
Standard Conc. : 200 ug/dl
Dilution of the serum : 3*
UIBC = TIBC – serum iron (SI)
Saturation ratio (%) = SI / TIBC X 100
TIBC (ug/dl) =
Absorbance of serum
X standard Conc. X 3*
Absorbance of standard

10. 주의사항 조기 공복 시 채혈 용혈 검체는 부적합 탈철처리 된 용기 사용 음식물 섭취에 따라 serum Fe가 달라짐
TIBC에는 변화가 없음
용혈 검체는 부적합
Hemoglobin 내 heme에 결합된 Fe에 의한 간섭현상
탈철처리 된 용기 사용
HCl 이나 HNO3를 이용하여 철을 유리시켜 제거

11. Homework
Electrophoresis 원리
Serum protein electrophoresis
임상적 의의