1. Clinical Biochemistry 2013 / 9 / 24
HDL – Cholesterol
Clinical Biochemistry
2013 / 9 / 24

2. Introduction HDL-cholesterol
HDL은 liver나 mucosal endothelial cell(gut)에서 생성
HDL molecule은 apolipoprotein AI, AII와 complex
(LDL과 차이)
HDL-cholesterol의 구조
Hydrophobic core
– Ester cholesterol(15%), triglyceride(7%)
Hydrophilic surface
– Free cholesterol(3%), phospholipid(25%),
apolipoprotein .

3. Introduction HDL-cholesterol function Reverse cholesterol transports
Primary major role
Free cholesterol ⇒ ester cholesterol (LCAT)
Negative risk factor of atherosclerosis

4. Introduction 임상적 의의 증가하는 경우 체구가 마른 경우 Estrogen 투여 시
Hyper-alpha-lipoproteinemia
감소하는 경우
비대한 경우, 당뇨병 환자, 고지혈증
Androgen 투여 시
an-alpha-lipoproteinemia

5. Principles 검체 전처리 (침전법) Serum + phosphotungstic acid-Mg2+
Polyvalent anion + apolipoprotein B → complex (침전)
LDL-cholesterol, VLDL-cholesterol은 침전
HDL-cholesterol이 상층에 존재 (검체로 사용)
Polyanion: heparin, dextran sulfate, phosphotungstate 등
2가 양이온: Mn++, Mg++, Ca++, 등

6. Principles Enzymatic method (COD-POD method) Ester cholesterol
Fatty acid + free cholesterol
cholesterol esterase
 cholesterol oxidase
H2O2 + △4-cholestenon
 peroxidase
Phenol + 4-Aminoantipyrine
Quinone complex (red)
500nm에서 흡광도 측정

7. Materials and methods Materials 전처리 시액 : phosphotungstic acid, MgCl2
효소 시액 : cholesterol esterase, cholesterol peroxidase, 4-aminoantipyrine
완충용 시액 : phosphate buffer, phenol
표준액 : cholesterol (50mg/dl)

8. 60분 이내에 시약blank를 대조로 파장 500nm에서 흡광도 측정
Materials and methods
Methods 검체 표준
Blank
혈청(ml)
0.2
분리시액(ml)
잘 혼합하여 10분간 실온에 방치후 3,000rpm에서 10분간 원심분리
상층액(ml)
0.1
표준액(ml)
D.W.(ml)
효소시액(ml)
3.0
잘 혼합하여, 37℃에서 5분간 방치
60분 이내에 시약blank를 대조로 파장 500nm에서 흡광도 측정

9. Materials and methods 계산법 Standard concentration : 50mg/dl
Reference values
Male : mg/dl
Female : mg/dl
Sample conc. (mg/dl) =
Sample Abs.
Standard Abs.
X 50 X2

10. Homework
Triglyceride (TG)
TG 측정법 원리 (효소법)
임상적의의