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Department of Biotechnology Life Science Experiments 생 명 과 학 실 험생 명 과 학 실 험 특성화학부 생명공학과 식물분자생물학 실험실 4.Mendelian segregation SUBJECT Transformation
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Department of Biotechnology Life Science Experiments 생 명 과 학 실 험생 명 과 학 실 험 특성화학부 생명공학과 식물분자생물학 실험실 4.Mendelian segregation Transformation ① Add plasmid into a 200ul competent cell and mix gently. ② Incubate on ice for 30min. ③ Heat-shock for 90sec at 42 ℃ (waterbath). ④ On ice for 2min. And add 1mL LB ⑤ Pre-culture, 37 ℃ incubator for 1hr ⑥ Sperad 40ul X-gal(40mg/ml) on LB/Amp plate. ⑦ Incubate 37 ℃ ON
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Department of Biotechnology Life Science Experiments 생 명 과 학 실 험생 명 과 학 실 험 PCR product4ul 5X Ligation Buffer2ul8ul pLUG vector1ul4ul T4 DNA ligase1ul4ul D.W2ul8ul Final volume10ul24ul pre-mix 6ul + PCR product 4ul = 10ul room-temperature overnight TA cloning PCR product At2g03090 At4g38400 At1g69530 At2g28950
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Department of Biotechnology Life Science Experiments 생 명 과 학 실 험생 명 과 학 실 험 ● X-Gal(5-bromo-4-chloro-3-indolyl-D-galactopyranoside) : lactose 대신 beta- galactosidase 에 의하여 대사되는 물질. 일종의 변형된 galactose sugar 로서 원 래 무색이지만 beta-galactosidase 에 의하여 대사되면 푸른색을 낸다.
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Department of Biotechnology Life Science Experiments 생 명 과 학 실 험생 명 과 학 실 험 특성화학부 생명공학과 식물분자생물학 실험실 ● Result & Discussion Fig 1. Sample name 7cm X400 - Satellite 란 ? - 결과에 대한 자신의 생각을 반드시 기술
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Department of Biotechnology Life Science Experiments 생 명 과 학 실 험생 명 과 학 실 험 특성화학부 생명공학과 식물분자생물학 실험실 다음 실험 예비 레포트 8.DNA isolation, PCR(Polymerase Chain Reaction) -DNA isolation 의 원리 -DNA isolation 간단한 실험방법 ( 사용 시약의 원리 위주 ) -PCR 의 원리 -PCR 에서의 Primer 와 Taq polymerase 란 ? 4.Mendelian segregation
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