2. ĐỘT BIẾN GEN MÃ HÓA CHUỖI α-GLOBIN
HS40
Chuỗi α-globin được mã hóa bởi hai gen α1-globin và α2-globin
Gen α2-globin biểu hiện gấp 3 lần gen α1-globin
Hầu hết đột biến điểm trong alpha-thalassemia xảy ra trên gen α2-globin
Đột biến điểm là nguyên nhân chính gây bệnh HbH

3. ĐỘT BIẾN GEN GÂY BỆNH HBH
--SEA/ααND
Đột biến
gây bệnh HbH
Tên đột biến
Kiểu đột biến
Đột biến mất đoạn
SEA
mất 2 gen α
Đột biến điểm
Hb Constant Spring
đột biến kéo dài chuỗi
Init CD ATG>A-G
đột biến mã mở đầu
Đột biến:
Init CD ATG>A-G
Vị trí đột biến:
HBA2: c.2delT

4. ĐỘT BIẾN MÃ MỞ ĐẦU GEN α2-GLOBIN
Đột biến tại mã mở đầu α2-globin làm dịch khung đọc và gây α+-thalassemia
A T G T T C C T G … … … … … … … … … ..T A A
Met Phe Leu
α-globin
Trình tự gen α2-globin bình thường
A G T T C C T G … … … A T G … … … ... ……… … … …T A A
Met
Trình tự gen α2-globin bị đột biến mã mở đầu (ATG  A-G)
α-globin biến thể

5. ĐỘT BIẾN MÃ MỞ ĐẦU GEN α2-GLOBIN
Novel mutation of the alpha 2-globin gene initiation codon (ATG-->A-G) in a Vietnamese girl with Hb H disease
Waye JS, Eng B, Patterson M, Chui DH, Nisbet-Brown E, Olivieri NF            
Phát hiện lần đầu tiên năm 1997 ở bé gái người Việt Nam
Năm 2005: Viprakasit phát hiện ở một bé trai bệnh HbH

6. Xây dựng quy trình xét nghiệm phát hiện đột biến mã mở đầu
GIẢI PHÁP ???
Xây dựng quy trình xét nghiệm
phát hiện đột biến mã mở đầu

7. THIẾT KẾ NGHIÊN CỨU Control 1,8 kb IN.VN.WT 794 bp a2-F IN.VN-F
IN.VN.mut
1,05 kb
IN.VN-R
a2-R
α2-globin gene
Mẫu
1,8 kb
1,05 kb
794 bp
H2O -
Bình thường X
Dương tính dị hợp tử
Dương tính đồng hợp tử

8. KẾT QUẢ THỰC HIỆN 1,8 kb 1,05 kb 794 bp
Mẫu
1,8 kb
1,05 kb
794 bp
H2O -
Bình thường X
Dương tính dị hợp tử
Dương tính đồng hợp tử NC +
H20 M
Test c.2delT
1,8 kb
1,05 kb
794 bp
Chú thích: M là đường chuẩn; NC là chứng người bình thường;
+ là mẫu mang đột biến c.2delT; H2O là chứng nước

9. HƯỚNG DẪN CHỈ ĐỊNH XÉT NGHIỆM
Lấy mẫu:
2 ml máu ngoại vi đựng trong ống chống đông EDTA .
Chuyển lên phòng xét nghiệm trong vòng 4h kể từ lúc lấy mẫu
2. Chỉ định:
“Phát hiện gen bệnh Thalassemia (bằng kỹ thuật PCR-PFLP)
(Alpha-Thalassemia, đột biến c.2delT)”
Giá tiền: đ (BHYT thanh toán 100%)
Về phần chỉ định xét nghiệm. Cũng tương tự như những xét nghiệm gen di truyền khác. Sử dụng 2 ml máu ngoại vi chống đông EDTA. Bảo quản mẫu ở 4 độ và chuyển lên khoa xn trong vòng 6h.
Chúng tôi đã liên hệ với phòng CNTT cập nhật tên xét nghiệm trong Medisoft là “Phát hiện……”
Gia của một xét nghiệm là được bảo hiểm thanh toán hoàn toàn.

10. CẬP NHẬT XÉT NGHIỆM THALASSEMIA
Phương pháp
Alpha - thalassaemia
Beta - thalassaemia
PCR
Đột biến
XN hiện làm
SEA x
CD 41/42
THAI
CD 17
FIL
CD 95
α4.2
CD 26
α3.7
CD 71/72
HbCS
IVSI-5
c.2delT
IVSI-1
-28
Strip Assay
Phát hiện 21 đột biến
α-Thalassemia
Phát hiện 22 đột biến
β-Thalassemia

11. Lời cảm ơn! GS. TS. AHLĐ Nguyễn Anh Trí và Lãnh đạo Viện
Trung tâm Thalassemia
Tập thể Khoa DT-SHPT