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Osservazione dei nuclei apoptotici di cellule HCT116 trattate con 5-FU Ø staccare le cellule Ø contare le cellule Ø centrifugare a 1300 rpm per 5’ Ø risospendere.

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1 Osservazione dei nuclei apoptotici di cellule HCT116 trattate con 5-FU Ø staccare le cellule Ø contare le cellule Ø centrifugare a 1300 rpm per 5’ Ø risospendere le cellule in Hoechst (5 mg/ml in PBS) alla concentrazione di 100 ml/ 106 cells Ø incubare 15’ a 37°C Ø centrifugare a 1900 rpm per 5’ Ø risospendere in PI (50 mg/ml in PBS) alla concentrazione di 50 ml/ 106 cells Ø deporre su vetrino e osservare al microscopio a fluorescenza

2 Colorazione con Ioduro di propidio e Hoecst

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5 staccare e contare le cellule centrifugare a 1300 rpm per 5’ risospendere le cellule in Arancio di Acridina (1 mg/ml) incubare per 15’ a T° ambiente deporre su vetrino e osservare al microscopio a fluorescenza

6 Colorazione con Arancio di acridina

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