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DNA 的抽取 元智大學通識中心 康世旭
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細胞的內容物 水 蛋白質 核酸( DNA 與 RNA) 醣類 礦物質與維生素(少量)
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如何把 DNA 萃取出來 水(溶劑) 蛋白質(溶質,遇到 phenol 之類的有機 溶劑,被失去功能,並且會沈澱出來) DNA (溶質,不怕 phenol 之類的有機溶 劑,但在鹼性溶液中,結構會發生改變) – 染色體(大分子的 DNA , 3000~ 10 6 kb) – 質體(小分子的 DNA , 2~1000 kb) 醣類與礦物質、維生素:一般而言,少 量,不影響我們的實驗
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DNA 結構與變性 在鹼性溶液或被加熱時 當 DNA 分子太大時,無法回 復為原形
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質體與染色體
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實驗器材與藥品 電泳槽 Micropipette 竹籤 手套 離心機 Quich screening buffer Phenol/chloroform tip eppendorf
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流程 以竹籤刮取菌(看得到菌塊就好了) 將沾有細菌的竹籤一端放在 eppendorf 中
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流程 加入 quick screening buffer( 鹼性液體) 將菌塊抖散 quick screening buffer 中 兩分鐘後,加入 phenol/chloroform (可中和鹼 性,並將蛋白質變性沈澱) 離心三分鐘 tip eppendorf
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流程 觀察離心後的結果 取 10 ul DNA 溶液,與 2 ul loading dye 混 合,進行 DNA 電泳 染色,觀察結果 大 小
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